于定国(?-前40)西汉丞相。字曼倩。东海郯县(今山东郯城西南)人。少时随父学法。为狱吏、郡决曹。宣帝时，任廷尉。为人谦恭，能决疑平法，被时人所称赞。后为丞相，封西平侯。
于定国少年随其父学习法律。其父去世，于定国依次担任狱史、郡决曹，后来到长安补廷尉史，因其材高被举为侍御史，转任御史中丞。汉宣帝在位时，于定国担任光禄大夫，平尚书事。本始三年(前71年)，于定国升任水衡都尉，地节元年(前69年)于定国又被擢任廷尉。于定国为人谦恭，处理案件平恕。时称“于定国为廷尉，民自以无冤”。担任廷尉十八年，甘露二年(前52年)，转任御史大夫。甘露三年，代黄霸为丞相，封西平侯。永光元年(前43年)于定国致仕，韦玄成为丞相。
他的儿子于永娶汉宣帝长女馆陶公主为妻。